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23966-1產品簡介
聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳個原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿"(proton sponge)體。PEI,可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。
二、下面讓我們來看看轉染試劑線性PEI溶液的配制(1mg/ml)
聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳個原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿"(proton sponge)體。PEI,可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明,分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966轉染效率zui高。
三、下面將主要介紹polysciences 線性PEI(#23966)的產品特性及其溶液的配制過程。
1. 產品特性:
產品名稱:線性聚乙烯亞胺(PEI)
CAS號:9002-98-6,26913-06-4
分子式:(CH2CH2NH)n
分子量:25000
熔點:73-75°C
外觀:白色或黃色固體
結構式
溶解性:溶于熱水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇;不溶于:苯,aether和丙酮
儲存:室溫
2. 溶液配制
此指導說明書是經polysciences公司研究,測試及其客戶反饋的后編寫的。下面推薦一種簡單適用而高效的方法,講述如何配制濃度為1mg/mL的轉染試劑的配制。
材料:
1g #23966、1L 純水(Milli-Q®純水,注射用水(WFI),或類似的生物級水)、12 M鹽酸、10 M氫氧化鈉、一次性0.1-0.2µm PES真空無菌過濾器、無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
器材:
1 L 玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、核準pH計、2支1 mL塑料移液管、托盤、聚四氟乙烯(PTFE)攪拌棒、真空泵
配制過程:
1g #23966——900mL水溶解——攪拌、加熱(60-80°C)——加HCl調pH到2.0左右——蓋上燒杯,攪拌3h(直至粉末*溶解)——冷卻至室溫——加NaOH調pH到6.9-7.1——移液到量筒,加水補足至1L——真空過濾消毒——分裝,-20°C保存。
備注:加熱或加酸都有助于PEI溶解。當然酸可能不用加那么多,詳細用量可試加一點攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那么低。
試劑儲存:
冷凍部分溶液可在-20°C保存長達一年;部分解凍的溶液可在4°C保存2周,不可反復凍融。
粉末儲存:
未開封的粉末有效期兩年??稍谑覝叵卤4嬷敝潦褂?。